使用巴氏染色液后結果不理想的原因有哪些？
巴氏染色液染片胞漿、胞核、胞膜清晰、易辨，紅藍相間。進口原料配制，染液的穩定性好，無嗅、無味、無刺激、吸附性強、不脫色，對涂片無特殊要求。研制的改良巴氏染液染色全程只需要5分鐘，改良巴氏染液染色全程只需要3分鐘，且步驟簡單，只需初染—復染—增色三步，省時、準確、操作簡便，即來即檢，立等可取檢查結果，無需梯度酒精脫水，二甲苯透明，可直接封片保存。
檢驗原理：
巴氏染色液中有蘇木素、橘黃、伊紅、俾士麥棕及亮綠等染料，其中蘇木素能與細胞核的核酸結合而顯紫藍色，其他染料可以與細胞漿中不同的化學成分結合而顯顏色。
使用方法：
1.將涂片置于95%乙醇中固定15分鐘以上；
2.依次浸入80%、50%乙醇中各30秒，水洗1～2分鐘；
3.浸入蘇木精染液中3～5分鐘，水洗1～2分鐘；
4.浸入鹽酸酒精分化液中分化數秒，水洗1～2分鐘；
5.浸入返藍液中數秒，水洗1～2分鐘；
6.置于95%乙醇中漂洗，水洗甩干；
7.浸入橘黃G染液染中1～3分鐘；95％乙醇漂洗、95％乙醇漂洗、100%乙醇漂洗各一次，時間各10～20秒；
8.浸入EA36染液(或EA50染液)中染色2～5分鐘，95％乙醇漂洗、95％乙醇漂洗、100%乙醇漂洗各一次，時間各10～20秒；
9.浸入浸蠟脫蠟透明液中2分鐘；
10.中性樹膠封固；
11.鏡檢。
染色結果：
上皮細胞：胞核呈紫藍色，核仁紅色；胞質受色隨分化程度和細胞類型不同可染成藍綠色、粉紅色或桔黃色；紅細胞：鮮紅色或橙紅色。白細胞：胞核藍紫色，胞質淡藍或淡綠色；粘液：淡藍或粉紅色。
使用巴氏染色液染色結果不理想原因分析：
1、細胞核著色不佳
（1）細胞核著色過淺：
鹽酸分化時間過長或蘇木素染液時間過長。需要縮短分化時間或延長堿化時間；每日加入少量新鮮蘇木素染液或重新配制蘇木素液。
在固定之前制片干燥。所以對巴氏染色的制片需要嚴格遵守濕固定的原則。
自來水的PH值偏酸性。使用堿性溶液。
（2）細胞核著色過深：
鹽酸溶液濃度不夠。適當加入幾滴鹽酸以增加濃度。
制片用高于95％以上濃度的酒精固定后可以出現染色過深。應用95％酒精固定。
2、細胞漿著色不佳
（1）如果全片內胞漿都淡染，則需要延長染色時間或更換新液。
（2）如果胞漿不分色，均為淺紅色。制片在固定前干燥或制片被有大量球菌樣細菌影響胞漿染色。此情況可以適當增加染色時間能夠部分糾正不分色狀況。
（3）胞漿染成灰色或紫色，是由于蘇木素染色時間過長或鹽酸分化不佳。經過褪色后重新蘇木素可以糾正。
（4）由于標本的不同，同樣配方的EA染液可造成偏藍、偏綠和偏紅，對不同的標本應該使用不同的EA染液。一般認為，EA36和EA50用于婦科標本，而EA65或改良EA用于非婦科標本。
（5）胞漿不分色的另一重要原因是由于EA染液的PH值不恰當所致。如染色為紅色，可以加少許磷鎢酸溶液糾正；如染色均為藍色或綠色，可以加少許飽和碳酸鋰溶液糾正。對于改良EA染液，每100ml染液加入2ml冰醋酸后染色效果更佳；染液使用更持久。
