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革蘭氏染色法是細菌學中普遍運用的種鑒別染色法，1884年由丹麥醫師Gram創建。未經染色之細菌，由于其與四周環境折光率差異甚小，故在顯微鏡下難察看。用光學顯微鏡停止察看，可十分輕松查找并鑒別抗酸桿菌。因而，本染色液在病原微生物學診斷、研討和教學工作中，均具有十分重要的意義和適用價值。

步驟

革蘭氏染色法般包括初染、媒染、脫色、復染等四個步驟，

具體操作方法是：

1）涂片固定。

2）草酸銨結晶紫染1分鐘。

3）自來水沖洗。

4）加碘液覆蓋涂面染約1分鐘。

5）水洗，用吸水紙吸去水分。

6）加95%酒精數滴，并輕輕搖動進行脫色，20秒后水洗，吸去水分。

7）蕃紅染色液（稀）染1分鐘后，自來水沖洗。干燥，鏡檢。

原理

通過結晶紫初染和碘液媒染后，在細胞壁內形成了不溶于水的結晶紫與碘的復合物，革蘭氏陽性菌由于其細胞壁較厚、肽聚糖網層次較多且交聯致密，故遇乙醇或丙酮脫色處理時，因失水反而使網孔縮小，再加上它不含類脂，故乙醇處理不會出現縫隙。

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