蘇木素伊紅(HE)染色液的染色原理
蘇木素(Hematoxylin)和伊紅( Eosin)染色，簡稱HE 染色，是病理學常規制片中最基本的染色方法，應用機器廣泛。蘇木精是從原產中南美的洋蘇木中提取出來的淺黃褐色的結晶，是一種堿性染色劑，它在被氧化后生成蘇木素，同媒染劑(常用的是三價的鋁或鹽鐵)一起使用，能夠使細胞核染色。在病理診斷、教學和科研工作中，常用HE 染色對正常組織和病變組織進行形態結構觀察。對于確定或鑒別病變組織、細胞中出現的某些異常物質與特殊成分，而需要采用的特殊染色方法、酶組織化學方法、免疫組織化學方法等也均是在觀察HE 染色組織切片的基礎上進行的。在HE 染色的組織切片中，細胞核呈藍色，細胞漿呈紅色，二者形成鮮明的對比，易于觀察分析。蘇木素伊紅染色試劑盒中，蘇木素染色液采用進口的高純度蘇木精、硫酸鋁鉀、甘油等組成，不含氧.化.汞、甲醇等有害物質，對細胞核染色效果好。其特點：長期保存，不易產生沉淀和金屬; 應用范圍廣，可以用于人、動物、畜牧、水產等領域，可以用于組織石蠟切片、冰凍切片和組織細胞的染色等；蘇木素染色液可以重復使用。
染色原理：
1、細胞核染色的原理：
蘇木素為堿性天然染料，可使細胞核著色。細胞核內染色質的成分主要是DNA，在DNA雙螺旋結構中，兩條核苷酸鏈上的磷酸基向外，使DNA 雙螺旋的外側帶負電荷，呈酸性，很容易與帶正電荷的蘇木素堿性染料以離子鍵或氫鍵結合而被染色。蘇木素在堿性溶液中呈藍色，所以細胞核被染成藍色。
2、細胞漿染色的原理：
伊紅是一種化學合成的酸性染料，在一定條件下可使細胞漿著色。細胞漿的主要成分是蛋白質，為兩性化合物，細胞漿的染色與染液的pH 值密切相關。當染液的pH 值在胞漿蛋白質等電點(4.7～5.0)以下時，胞漿蛋白質以堿式電離，則細胞漿帶正電荷，就可被帶負電荷的酸性染料染色。伊紅在水中離解成帶負電荷的陰離子，與胞漿蛋白質帶正電荷的陽離子結合，使細胞漿著色，呈現紅色。
3、分化作用：
染色后，用某些特定的溶液將組織過多結合的染色劑脫去，這個過程稱為分化作用，所用的溶液稱為分化液。在HE 染色中常用1%鹽酸乙醇作為分化液，因酸能破壞蘇木素的醌型結構，使組織與色素分離而退色。經蘇木素染色后，必須用1%鹽酸乙醇分化，使細胞核過多結合的蘇木素染料和細胞漿吸附的蘇木素染料脫去，再進行伊紅染色，才能保證細胞核與細胞漿染色的分明。
4、返藍作用：
分化之后，蘇木素在酸性條件下處于紅色離子狀態，呈紅色；在堿性條件下處于藍色離子狀態，呈藍色。組織切片經酸性乙醇分化后呈紅色或粉紅色，故分化之后，立即用水除去組織切片上的酸而中止分化，再用弱堿性水使蘇木素染上的細胞核呈現藍色，這個過程稱為返藍作用或藍化作用。另外用自來水浸洗也可使細胞核返藍，但所需時間較長。
注意事項：
1、切片脫蠟應盡量干凈。
2、95%乙醇、90%乙醇、80%乙醇應經常更換新液。
3、1%的鹽酸乙醇分化液的分化時間應該依據切片厚薄、組織的類別和1%的鹽酸乙醇分化液的新舊而定，另外分化后自來水沖洗時間應該足夠，以便徹底清洗酸。
4、yi醚-乙醇混合固定液是由yi醚和95%乙醇等量混合而得，再加入適量乙酸，密閉保存。
5、冷凍切片染色時間盡量要短。
6、促藍液常使用0.2～1%氨水水溶液或Scoot 促藍液或0.1～1%碳酸鋰水溶液。
7、為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。
8、使用場所應通風，并遠離火源。
