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革蘭氏染色液的保存方法

文章出處:本站 人氣:2515 發表時間:2020-03-24 15:14:31

革蘭氏染色液使用注意事項以及保存方法:


用途:革蘭氏染色液用于分子生物學中的培養


原理:蛋白胨提供碳源和氮源;葡萄糖提供能源;瓊脂是培養基的凝固劑。


用法:稱取本品65.0g,加熱攪拌溶解于1000ml蒸餾水中121℃高壓滅菌15分鐘,冷卻至50℃左右時,加入過濾除菌的氯霉素50mg,混勻,傾入無菌平皿。


【注意事項】:由于液體培養基不易長期保管,現在均改制成粉末。


培養基有天然、人工兩種革蘭氏染色液般實驗室使用的是RPMI-1640粉末培養基,以雙蒸或三蒸水配制。NaHCO3(或HCl)調pH至7.2~7.4,若pH值超過7.6或遠低于6.8,則大多數細胞不能生長。RPMI-1640不耐高壓滅菌,使用前需經滅菌0.22μm孔徑濾膜濾過處理。


革蘭氏染色液的保存


1)干粉,買了后定要保存在4度。有人保存在-20度我認為沒有必要。但4度是非常必要的。保證期是有提示的。


2)配好的無血清培養基定保存在4度,保存不要超過3個月。用時根據提示要加入谷胺酰胺。


3)加入血清的培養基,好保存在4度不要超過1個月,從時間太長,活性下降。當然稍微長點也不定出問題。但是根據細胞而定;如果原代培養,好新鮮,如果是腫瘤細胞,或僅維持傳代就不太要緊。但是原則是越新越好。




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